Differenza tra colorazione di Gram e coltura

Differenza chiave - Gram Stain vs Culture
 

La colorazione di Gram è una tecnica di colorazione che viene eseguita per differenziare i batteri in due gruppi in base allo spessore dello strato di peptidoglicano nella loro parete cellulare. La coltura è un metodo per coltivare e mantenere microrganismi in condizioni di laboratorio per analisi diverse. La principale differenza tra la colorazione e la cultura dei grammi è la loro funzione; grammo strain una tecnica di colorazione dei batteri in cui la cultura è un metodo di crescita e mantenimento dei microrganismi.

CONTENUTO
1. Panoramica e differenza chiave
2. Che cos'è Gram Stain
3. Cos'è la cultura
4. Confronto affiancato - Gram Stain vs Culture
5. Sommario

Che cos'è Gram Stain?

La colorazione di Gram è un'importante tecnica di colorazione differenziale utilizzata per l'identificazione batterica in Microbiologia. Questa tecnica fu introdotta dal batterio danese Hans Christian Gram nel 1884. La colorazione di Gram classifica i batteri in due gruppi principali: gram-positivo e gram-negativo; questi sono molto importanti nella classificazione e identificazione batterica. La colorazione di Gram viene eseguita come fase iniziale per la caratterizzazione batterica.

I batteri sono raggruppati in base alle differenze nella loro parete cellulare. I batteri Gram-positivi contengono uno spesso strato di peptidoglicano nella loro parete cellulare mentre i batteri Gram-negativi contengono un sottile strato di peptidoglicano nella loro parete cellulare come mostrato nella figura 01. Il risultato della colorazione del grammo sarà basato sulla differenza di spessore nello strato di peptidoglicano del parete cellulare.

Figura 1: batteri Gram-positivi e batteri Gram-negativi

La colorazione di Gram è eseguita utilizzando quattro diversi reagenti e precisamente; macchia primaria, mordente, decolorante e contro-macchia. Crystal violet e safranin fungono da primarie e contro macchie, rispettivamente mentre i grammi di iodio e il 95% di alcool fungono rispettivamente da mordente e decolorante,.

Fasi di base della colorazione Grams

  1. Uno striscio batterico viene preparato su un vetrino pulito, fissato al calore e raffreddato.
  2. Lo smear è inondato di crystal violet per 1 - 2 minuti.
  3. Lo smear è sciacquato con acqua corrente a flusso lento per rimuovere le macchie in eccesso.
  4. Lo iodio Grammo viene applicato allo smear per 1 minuto.
  5. Il risciacquo viene risciacquato con acqua corrente lenta
  6. L'imbrattatura viene lavata con alcol al 95% per 2 - 5 secondi e risciacquata con acqua corrente lenta.
  7. La macchia è contro-colorata con safranin per 1 minuto
  8. Il risciacquo viene risciacquato con acqua corrente lenta, asciugata e osservata al microscopio.

Alla fine della colorazione del grammo, i batteri gram negativi saranno osservati in colore rosa mentre i batteri grammi positivi saranno osservati in colore viola come mostrato nella Figura 02. Il risultato della colorazione dei grammi è deciso dallo spessore dello strato di peptidoglicano in la loro parete cellulare. Durante la fase di decolorazione, la macchia primaria e il mordente vengono facilmente rimossi dai batteri gram negativi e diventano incolori poiché hanno uno strato di peptidoglicano sottile. La macchia primaria è trattenuta nei batteri positivi grammi poiché hanno uno spesso strato di peptidoglicano. Contro macchia non sarà efficace per grammi di batteri positivi a causa della ritenzione della macchia primaria. Quindi grammi di batteri positivi saranno visibili nel colore delle macchie primarie, cioè il colore viola. La contro-macchia colorerà i batteri gram-negativi e sarà visibile nel colore scelto, che è il colore safranin. Quindi, è facile classificare i batteri in due gruppi con la colorazione del grammo ed è prezioso nella differenziazione e identificazione batterica.

Figura 2: Gram Strain

Cos'è la cultura?

La coltura microbica è un metodo di coltura e mantenimento di microrganismi in condizioni di laboratorio per scopi diversi. Le colture vengono coltivate in terreni solidi, semisolidi e liquidi in base al tipo e allo scopo della coltura dei microrganismi. Le colture vengono fornite con i nutrienti necessari e le condizioni di crescita richieste dai microrganismi. Ci sono diverse componenti di un mezzo di coltura come fonte di energia, fonte di carbonio, fonte di azoto, minerali, micronutrienti, acqua, agente di solidificazione, ecc. La temperatura ottimale, l'ossigeno e il pH dovrebbero essere regolati in base al tipo di microrganismo cresciuto.

Esistono diversi tipi di colture microbiche; ad esempio, coltura in lotti, coltura continua, coltura di coltelli, coltura di piastre di agar, coltura di brodo, ecc. Secondo la composizione del terreno di coltura, esistono diversi tipi di terreni di coltura noti come supporti sintetici, semi-sintetici e naturali. Le colture microbiche vengono preparate in condizioni sterili all'interno di una camera speciale chiamata flusso d'aria laminare. Il terreno in crescita e la vetreria vengono sterilizzati prima dell'inoculo del microrganismo desiderato. In condizioni sterili appropriate, il microrganismo bersaglio viene trasferito nel terreno nutritivo sterilizzato e incubato a temperatura ottimale. All'interno del mezzo, il microrganismo crescerà e si moltiplicherà utilizzando i nutrienti forniti.

Figura 3: coltura batterica sulla piastra

Qual è la differenza tra Gram Stain e Culture?

Gram Stain vs Culture

Il ceppo Gram è una tecnica di colorazione differenziale utilizzata per la differenziazione e l'identificazione batterica. La coltura microbica è un metodo di coltivazione di microrganismi in laboratorio.
componenti
Questo utilizza diversi reagenti tra cui due macchie. Questo utilizza diversi terreni di coltura come mezzi solidi, semisolidi e liquidi composti da nutrienti e altre condizioni necessarie.
Funzioni base
Ciò consente di raggruppare i batteri in due gruppi: grammi negativi e grammi positivi. Ciò consente la moltiplicazione di microrganismi per scopi diversi.
Base 
L'esito della colorazione di Gram si basa sulle differenze nello strato di peptidoglicano della parete cellulare.  I microrganismi cresceranno e si moltiplicheranno all'interno dei terreni di coltura.
Risultato
I batteri gram-negativi sono visibili nel colore rosa e grammi i batteri positivi sono visibili nel colore viola. Sui piatti si possono vedere colonie di microrganismi. Sui mezzi liquidi, i microrganismi sono in forma sospesa.

Sommario - Gram Stain vs Culture

Le colture microbiche vengono preparate e mantenute in condizioni di laboratorio per scopi diversi quali conservazione, test, purificazione chimica, ecc. La colorazione di Gram è una procedura di colorazione che differenzia i batteri in due gruppi principali chiamati grammi di batteri negativi e grammi di batteri positivi. Pertanto, la differenza tra la colorazione dei grammi e la coltura è che la colorazione dei grammi è una tecnica di colorazione dei batteri, mentre la coltura è un metodo per coltivare e mantenere microrganismi nei laboratori.

Riferimento:
1. Aryal, Sagar. "Colorazione Gram: Principio, Procedura, Interpretazione, Esempi e Animazione." Note di microbiologia online. N.p., 20 settembre 2015. Web. 01 marzo 2017.
2. "Cultura microbiologica". Wikipedia. Wikimedia Foundation, 01 febbraio 2017. Web. 01 marzo 2017
3. Kumar, Sabarish. "Quali sono le tecniche di base della coltura microbica?" Quali sono le tecniche di base della coltura microbica? N., n. Web. 01 marzo 2017

Cortesia dell'immagine:
1. "Gram-Cell-wall" Graevemoore Inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia
2. "Gram Strain" di Y tambe - Archivio di Y tambe (CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia
3. "Cultura dell'antrace" di Foto di Istituto di ricerca medica dell'esercito americano di malattie infettive -  (Dominio pubblico) tramite Commons Wikimedia