Differenza tra fase inversa e fase normale HPLC

Il differenza fondamentale tra fase inversa e fase normale HPLC è che il HPLC in fase inversa utilizza una fase stazionaria polare e una fase mobile meno polare mentre la fase normale HPLC utilizza una fase stazionaria non polare e una fase mobile polare.

L'HPLC in fase normale è la più antica tecnica di HPLC che Tswett usava nelle sue separazioni di estratti vegetali; ha usato il gesso in una colonna di vetro. Questa era la classica modalità di cromatografia che ha portato a chiamarla la tecnica "normale". L'HPLC a fase inversa, d'altra parte, è l'opposto della normale tecnica, che gli scienziati hanno sviluppato recentemente.

CONTENUTO

1. Panoramica e differenza chiave
2. Che cos'è l'HPLC a fase inversa
3. Cos'è l'HPLC a fase normale
4. Confronto affiancato - Fase inversa rispetto a HPLC a fase normale in forma tabulare
5. Sommario

Che cos'è l'HPLC a fase inversa?

HPLC a fase inversa è una tecnica cromatografica in cui viene utilizzata una fase stazionaria idrofoba. Tra tutti i metodi HPLC, utilizziamo questo metodo per circa il 70% a causa della sua ampia applicabilità e riproducibilità. La fase stazionaria è non polare e la fase mobile è polare.

Nella maggior parte dei casi, gli scienziati usano una miscela acquosa di acqua con un solvente organico polare miscibile, come acetonitrile o metanolo come fase mobile. Pertanto, gli analiti interagiscono con la fase stazionaria non polare.

Cos'è l'HPLC a fase normale?

HPLC in fase normale è una tecnica cromatografica in cui utilizziamo una fase stazionaria idrofilica. È il metodo tradizionale di HPLC, anche se non lo usiamo più di tanto. La fase stazionaria è polare e la fase mobile è non polare. Ancora più importante, la fase mobile di questa tecnica è al 100% organica. Significa che non viene utilizzata acqua per questo.

Figura 01: un profilo campione per cromatogrammi HPLC a fase normale e inversa in base alla polarità dei componenti nell'analita.

Tipicamente, la fase stazionaria contiene fasi di silice, ciano, diolo, legami amminici, ecc. Le fasi mobili comprendono solventi organici come esano, etil acetato, ecc. Questa tecnica si basa sulla ritenzione di molecole di solvente o di analita sulla fase stazionaria polare.

Qual è la differenza tra fase inversa e fase normale HPLC?

HPLC a fase inversa è una tecnica cromatografica in cui viene utilizzata una fase stazionaria idrofoba. La fase stazionaria di questa tecnica è non polare. La fase stazionaria è non polare mentre la fase mobile è polare. Inoltre, gli scienziati usano una miscela acquosa di acqua con un solvente organico polare miscibile, come acetonitrile o metanolo come fase mobile in HPLC a fase inversa. Mentre l'HPLC in fase normale è una tecnica cromatografica in cui utilizziamo una fase stazionaria idrofilica. La fase stazionaria di questa tecnica è polare. La fase stazionaria è polare mentre la fase mobile è non polare. In aggiunta a ciò, gli scienziati usano solventi organici come esano, etil acetato, ecc. Come fase mobile di HPLC a fase normale. L'infografica sottostante presenta la differenza tra fase inversa e fase normale HPLC in forma tabellare.

Sommario - HPLC a fase inversa rispetto a fase normale

Le tecniche HPLC a fase inversa e fase normale sono due tecniche cromatografiche liquide. La differenza tra HPLC in fase inversa e in fase normale è che l'HPLC in fase inversa utilizza una fase stazionaria polare e una fase mobile meno polare mentre l'HPLC in fase normale utilizza una fase stazionaria non polare e una fase mobile polare.

Riferimento:

1. Acque "Modalità di separazione HPLC". HPLC - Cromatografia liquida ad alta prestazione Spiegazione: Acque. Disponibile qui  
2. "Cromatografia liquida a fase normale per la separazione di isomeri e composti che sono instabili nell'ambiente acquoso." Normal_Phase_LC. Disponibile qui