Differenza tra HPLC e UPLC

Il differenza fondamentale tra HPLC e UPLC è che il L'HPLC consente l'analisi di particelle di dimensioni pari a circa 5 micrometri, mentre l'UPLC consente particelle molto più piccole intorno ai 2 micrometri.

HPLC e UPLC sono entrambe tecniche di cromatografia liquida che sono utili per separare i componenti di un composto. Per conoscere la differenza tra HPLC e UPLC, dobbiamo prima sapere cos'è l'HPLC. Questo perché UPLC è una versione speciale di HPLC e possiamo facilmente capirlo se sappiamo cos'è l'HPLC.

CONTENUTO

1. Panoramica e differenza chiave
2. Che cos'è HPLC
3. Cos'è UPLC
4. Confronto affiancato - HPLC vs UPLC in forma tabulare
5. Sommario

Che cos'è HPLC?

Il termine HPLC sta per High Performance Cromatografia liquida. È una tecnica che possiamo usare per separare diversi costituenti di un composto. Inoltre, è la tecnica più utilizzata per identificare, quantificare e separare i componenti di una miscela. Inoltre, questa tecnica utilizza un'alta pressione per spingere i solventi attraverso la colonna. Inoltre, le principali applicazioni dell'HPLC sono in biochimica per l'analisi dei costituenti di un composto. È un modo ideale per la separazione e l'identificazione di aminoacidi, acidi nucleici, proteine, idrocarburi, pesticidi, carboidrati, antibiotici, steroidi e innumerevoli altre sostanze inorganiche.

Figura 01: sistema HPLC in un laboratorio

In breve, il metodo di funzionamento della tecnica HPLC è il seguente. Innanzitutto, dovremmo introdurre il campione nel flusso della fase mobile in piccole quantità discrete utilizzando una pompa. La pressione della pompa deve essere mantenuta a 40 MPa. Quindi, questo flusso di fase mobile percola attraverso la colonna di HPLC. Inoltre, i componenti nel campione passano attraverso la colonna. Tuttavia, le loro velocità di movimento sono diverse l'una dall'altra. Questa differenza deriva dalla differenza nelle interazioni tra i componenti del campione e l'adsorbente all'interno della colonna. Chiamiamo questo adsorbente come fase stazionaria perché risiede all'interno della colonna (non in movimento). In secondo luogo, alla fine della colonna, possiamo raccogliere il campione che eluisce dalla colonna. Lì possiamo determinare le differenze nei tempi di ritenzione per ciascun componente nel campione.

Cos'è UPLC?

Il termine UPLC sta per Cromatografia liquida ad altissime prestazioni. È una variazione di HPLC, ma il metodo di funzionamento è lo stesso. Tuttavia, a differenza dell'HPLC, questo metodo consente di analizzare particelle molto piccole, ad esempio 2 micrometri di piccole particelle.

Figura 02: un dispositivo UPLC

Inoltre, fornisce un'analisi più veloce. In questa tecnica, usiamo una pressione della pompa di 100 MPa per l'inserimento del campione nella colonna. Quindi, questa alta pressione conferma che l'intero campione viene introdotto nella colonna. Pertanto, questo è molto efficiente rispetto a HPLC.

Qual è la differenza tra HPLC e UPLC?

Il termine HPLC è acronimo di cromatografia liquida ad alta prestazione mentre il termine UPLC sta per cromatografia liquida ad altissima prestazione. Pertanto, la tecnica UPLC è una versione sviluppata di HPLC. Pertanto, il metodo di funzionamento è lo stesso per entrambe le tecniche. Tuttavia, UPLC è più efficiente rispetto all'HPLC perché utilizza un'elevata pressione della pompa; la pressione della pompa per HPLC è di 40 MPA mentre è di 100 MPa per UPLC. Pertanto, questa è una differenza tra HPLC e UPLC. Soprattutto, la differenza chiave tra HPLC e UPLC è che l'HPLC consente l'analisi di particelle di dimensioni pari a circa 5 micrometri, mentre l'UPLC consente particelle molto più piccole intorno a 2 micrometri.

Riepilogo: HPLC vs UPLC

UPLC è una forma di HPLC. Pertanto, i metodi operativi sono gli stessi. Ma possiamo trovare alcune funzionalità migliorate in UPLC rispetto a HPLC. Pertanto, c'è qualche differenza tra HPLC e UPLC. Tuttavia, la differenza chiave tra HPLC e UPLC è che l'HPLC consente l'analisi di particelle di dimensioni pari a circa 5 micrometri mentre l'UPLC consente particelle molto più piccole intorno a 2 micrometri.

Riferimento:

1. "Cromatografia liquida ad alte prestazioni." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 ottobre 2018. Disponibile qui
2. "UPLC." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25 ottobre 2017. Disponibile qui  

Cortesia dell'immagine:

1. "Hplc" di Kjaergaard su Wikipedia in inglese (dominio pubblico) via Commons Wikimedia 
2. "Immagine di un dispositivo UPLC" di Groep29 BFW - Opera propria, (dominio pubblico) tramite Commons Wikimedia