Perché l'acetocarmine viene utilizzato negli studi sul cromosoma mitotico

Macchie diverse sono utilizzate nella colorazione di diversi materiali biologici. Le macchie reagiscono con una sostanza specifica in un campione biologico, dando un colore specifico a quella sostanza. L'acetamarmina è una macchia utilizzata per la dimostrazione degli acidi nucleici all'interno del cromosoma. Ci sono anche alcuni altri motivi che rendono l'acetocarmine più adatta come macchia di acido nucleico. Sono discussi in questo articolo.

Aree chiave coperte

1. Cos'è una macchia
     -  Definizione, tipi di macchie
2. Cos'è Acetocarmine
     - Definizione, caratteristiche, preparazione
3. Perché l'acetocarmine viene utilizzato negli studi sul cromosoma mitotico
     - Preparazione, uso di Acetocarmine

Termini chiave: Acetocarmine, cromosomi, formaldeide, idrolisi, studi sul cromosoma mitotico, macchie

Cos'è la colorazione

La colorazione è una tecnica utilizzata negli studi al microscopio di campioni biologici per migliorare il contrasto del campione biologico al microscopio. Mette in evidenza le strutture del tessuto biologico come specifiche popolazioni cellulari, organelli, DNA, proteine, carboidrati e lipidi. La macchia può essere costituita da sostanze chimiche sintetiche o sostanze chimiche naturali originate da piante o animali. I metodi di colorazione sono descritti di seguito.

1. Singola colorazione - Nella colorazione singola, viene usata una sola macchia per dare un unico colore all'intero campione biologico.
2. Doppia colorazione - Nella doppia colorazione, vengono utilizzate due macchie per macchiare specifici organelli o un'area specifica.
3. Colorazione multipla - Nella colorazione multipla, più di due macchie vengono utilizzate per la colorazione specifica di componenti come organelli nel campione.

Cos'è Acetocarmine

Il carminio è una tinta base preparata da un insetto noto come Coccus cacti. L'acetocarmine è prodotto miscelando carminio con acido acetico glaciale. È una macchia specifica al DNA utilizzata per la visualizzazione di cromosomi a supercolori durante le diverse fasi della mitosi.

Preparazione della macchia di acetocarmina

1. Sciogliere 10 g di carminio in 1 L di acido acetico glaciale al 45%.
2. Aggiungi granuli di alluminio e riflusso per 24 ore.
3. Filtrare in bottiglie scure e conservare a 4 ° C.
4. La colorazione può essere intensificata aggiungendo cloruro ferrico (aggiungere 5 mL di una soluzione di cloruro ferrico al 10% per 100 mL di% acetocarmine).

Perché la colorazione dell'acetocarmine viene utilizzata negli studi sul cromosoma mitotico

Generalmente, l'acetocarmina è una tintura utilizzata in una singola colorazione. Macchia sia il nucleo che il citoplasma. Per colorare i cromosomi mantenendo incolore il citoplasma, il campione biologico deve essere prima trattato con formaldeide e quindi può essere idrolizzato con HCl a 60 ° C con il giusto tempo di idrolisi. Infine, può essere trattato con acetocarmine. L'acetamarmina produce grandi aggregati di colorante in condizioni debolmente acide (pH 4-5). La dimostrazione della mitosi della radice di cipolla mediante colorazione con acetocarmine è mostrata in Figura 1.

Figura 1: mitosi della radice della cipolla

Tuttavia, l'acetocarmine è leggermente tossico rispetto alle altre macchie di acido nucleico come l'aceto-orceina. È anche più economico rispetto ad altri tipi di macchie.

Conclusione

Le macchie sono utilizzate in studi microscopici per migliorare il contrasto di specifici componenti biologici in un campione. L'acetocarmina è una macchia usata per colorare l'acido nucleico all'interno delle cellule. Poiché l'acetocarmine macchia in modo specifico i cromosomi separatamente dal citoplasma, può essere utilizzato per visualizzare i cromosomi negli studi mitotici.

Riferimento:

1. "ACETOCARMINE STAINING." Kansas State University, disponibile qui.
2.J. A. Rattenbury (2009) Colorazione specifica della sostanza nucleotidica con acetone-carminio, tecnologia delle macchie, disponibile qui.

Cortesia dell'immagine:

1. "Mitosi della radice di cipolla" Da staticd - Opera propria (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia